본 연구에서는 고감도 바이오센서기술을 활용한 민감도가 높은 객담도말검사법을 개발하여 결
핵의 실험실 진단에 적용하고자 형광염색 방법으로 현재 널리 이용되고 있는 auramine
-rhodamine 염색법 (항산균과 비항산균 구별)을 이용하여 현미경 프로그램으로 자동화 하는 방
법을 구축하였고, 이 방법과 기존 manual로 염색균수를 측정하는 방법과 비교 분석 하였다. 형광
이미지를 처리하여 시야내의 결핵균 수를 측정하기 위하여 threshold method를 이용해 이미지를
이진화한 후(binary image), labeling을 활용하여 이진화 된 이미지에서 노이즈 소스를 제거하는
알고리즘을 구현하였다. 컴퓨터로 제어 가능한 linear stage를 이용하여 자동 검사 장비를 구성하
고 구성한 자동검사장비를 이용하여 복수 시야에서 결핵균 개수를 측정한 후, 검안 결과와 비교
한 결과 검안 결과와 비숫한 상관성이 있음을 알 수 있었다. 또한 생존결핵균과 사멸결핵균을
구별하기 위하여 생균에 염색되어 형광을 띄는 fluorescein diacetate-propidium iodide(FDA)와 사
균에 염색되어 형광을 띄는 propidium iodide (PI) 염색을 실시한 결과 in vitro에서 구별이 가능
함을 확인하였다. 결핵 특이적인 항체를 통한 결핵균과 비결핵균을 구별 가능성을 확인하고자
여러 항원(CFP10, ESAT6, PGL-tb 등)에 대한 단클론 항체를 제조하였으며, PGL-tb에 대한 항체
로 결핵균 특이적으로 염색이 됨을 확인하였다. 이상의 결과를 통하여 객담도말검사법에서
auramine-rhodamine 염색을 통한 자동 균수 측정 방법이 본 연구에서 개발된 컴퓨터 제어 알고
리즘을 통해서 가능함을 제시하였으며, 결핵균의 상태(생균과 사균)에 대한 염색법, 결핵균과 비
결핵균의 염색이 형광현미경 상에서 가능함을 확인하였다.