삼일열원충 분리주에 감염된 혈액으로부터 삼일열원충 유전자 라이브러리를 구축하여 대용량 염기서
열을 분석하였다. 대량의 염기서열 분석을 위해서 3730XL (Applied Biosystems, USA)을 이용하여
10,078 클론들을 5’쪽 말단 시퀀싱을 진행하였다. 염기서열 분석을 통해 획득한 trace data를 seqclean
program을 이용하여 최종적으로 100 bp 이상인 9,460 클론들만 다음 분석에 이용하였다. TIGR에서 제
공하는 ESTs assembler인 TGICL을 이용하여 clustering 및 assembly를 수행한 결과를 바탕으로
PlasmoDB-9.0_PvivaxSaI1_Annotated CDSs 데이터베이스를 이용하여 1,435 클론과, Genescan 데이터
베이스를 이용하여 98 클론을 선별하였다. 완전장 유전자의 염기서열을 해독하기 위해서 5’쪽의 시퀀싱
결과와 primer 3를 이용하여 primer walking 방법으로 유전자의 염기서열 모두를 해독하였다. 최종적
으로 UTR 영역과 CDS 부분을 포함하고 있는 1,436 클론의 완전장 유전자를 대량 확보하였고, 유전자
사이즈는 920bp에서 3,566bp 까지 다양한 길이를 가지며 평균 사이즈는 1892.8bp로 분석되었다. 선별된
클론들은 장기 보관을 위해서 20% glycerol cell stock을 만들어서 -80℃에 보관하였다. 1,436 클론의
완전장 유전자 분석 및 데이터베이스를 구축하기 위해서 NCBI에서 제공하는 NT, NR 데이터베이스를
사용하였고 Gene Ontology (GO)와 KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes) 데이터베이
스 분석을 통하여 유전자 프로파일링을 작성 하였다. Gene Ontology (GO) 데이터베이스는 확보되어진
유전자들 사이의 기능비교 및 통계적 유의관계에서 비롯되어지는 의미성에 따르는 생물학적 특성을 살
펴보기 위한 것으로 생물학적 과정에서는 cellular process (490), metabolic process (444)와 biological
regulation (87) 순으로 가장 많았고, 세포 요소 경우에는 cell(452), organelle (267) 그리고
macromolecular complex (156)로 분석 되었고, 분자 기능은 binding (436) 그리고 catalytic activity
(366) 순으로 가장 많은 것으로 분석 되었다. 그리고, 완전장 유전자에 대한 대사 작용을 포함한 여러
가지 분자간의 상호작용을 파악하기 위하여 KEGG 데이터베이스를 바탕으로 기능 카테고리와 대사 경
로를 분석을 확인하였다. 분석된 삼일열원충 완전장 유전자 1,436 클론에 대한 모든 유전정보 및 기능
데이터는 웹 서버 구축을 통하여 유전자 탐색이 가능하게 되었다.